核酸蛋白檢測儀應(yīng)用及方法

核酸蛋白檢測儀

核酸蛋白檢測儀是層析分析的主要裝置，核酸蛋白檢測儀配上層析柱、恒流泵、部分收集器、層析譜分析系統(tǒng)（根據(jù)需要選配）和電腦打印設(shè)備即構(gòu)成一套完整的核酸蛋白檢測儀分離層析系統(tǒng)。它是當(dāng)今從事生命科學(xué)研究、藥物測定、化工、食品科學(xué)及醫(yī)學(xué)研究等行業(yè)的現(xiàn)代分析實驗儀器。核酸蛋白檢測儀分析系統(tǒng)廣泛用于工業(yè)、農(nóng)業(yè)、科研和大專院校的科學(xué)研究和教學(xué)實驗。

核酸蛋白檢測儀其原理是根據(jù)物質(zhì)（樣品）對紫外光有明顯吸收的特征，實現(xiàn)對樣品成份含量比對分析，以便進行樣品蛋白、核酸物質(zhì)識別檢測和含量測定。在生化分析、環(huán)?？茖W(xué)、食品研究、毒理研究、新藥開發(fā)等領(lǐng)域中對核酸、蛋白檢測、純化和提取提供了一種的分析手段。

紫外分析儀

紫外檢測原理基于被測組分和背景電解質(zhì)的吸光度不同，當(dāng)被檢測組分通過檢測窗時，吸光度發(fā)生變化服從朗伯-比爾定律，即在一定的實驗條件下，吸光度與被測組分的濃度成正比。

紫外分析儀用于核酸蛋白檢測

紫外-可見光分光光度計在生物科技中可用于測定核酸和蛋白質(zhì)的濃度。

首先，核酸的基本結(jié)構(gòu)單位是核苷酸。核苷酸由一個含氮堿基（嘌呤或嘧啶），一個戊糖（核糖或脫氧核糖）和一個或幾個磷酸組成。由于核酸的堿基具有共軛雙鍵，因而有紫外吸收的性質(zhì)。各種堿基、核苷和核苷酸的吸收光譜略有區(qū)別。核酸的紫外吸收峰在260nm附近，可用于測定核酸。根據(jù)260nm與280nm的吸收光度（A260）可判斷核酸純度。

再談蛋白質(zhì)，構(gòu)成它的組成是氨基酸，其中的種類包含酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸，這幾種芳香族氨基酸的苯環(huán)含有共軛雙鍵，使蛋白質(zhì)具有吸收紫外光的性質(zhì)。吸收高峰在280nm處，其吸光度（即光密度值）與蛋白質(zhì)含量成正比。所以，紫外吸收法是280 nm 的光吸收法，含有核酸的蛋白質(zhì)溶液使用280 和260 nm 的吸收差法較好。蛋白質(zhì)的稀溶液采用215 與225 nm 的吸收差法。

此外，蛋白質(zhì)溶液在238nm的光吸收值與肽鍵含量成正比。利用一定波長下，蛋白質(zhì)溶液的光吸收值與蛋白質(zhì)濃度的正比關(guān)系，可以進行蛋白質(zhì)含量的測定。紫外吸收法簡便、靈敏、快速，不消耗樣品，測定后仍能回收使用。

還有一些測定蛋白質(zhì)的方法，是通過蛋白質(zhì)與一些物質(zhì)的作用產(chǎn)生顏色，然后在此有色光光譜內(nèi)測定吸光度。將已知濃度的蛋白質(zhì)溶液稀釋幾個倍數(shù)，與物質(zhì)作用后作為標(biāo)準品，測定吸光度做出一條曲線，然后未知溶液的濃度就可通過吸光度來得出。這些方法包括，凱氏定氮法，考馬斯亮藍法（Bradford），F(xiàn)olin-酚試劑法（Lowry法）和BCA法。